質(zhì)粒小量抽提試劑盒采用了一種新型的離子交換柱。在特定條件下,使質(zhì)粒能在離心過柱的瞬間,結(jié)合到質(zhì)粒純化柱上,在一定條件下又能將質(zhì)粒充分洗脫,從而實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒的快速純化。無需酚氯仿抽提,無需酒精沉淀。抽提所得到的質(zhì)粒可直接用于轉(zhuǎn)染細(xì)胞,DNA測(cè)序,PCR,基于PCR的突變,體外轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)化細(xì)菌,內(nèi)切酶消化等。在使用溶液PB的情況下,獲得的質(zhì)粒的純度更高,內(nèi)毒素含量低,總體上轉(zhuǎn)染細(xì)胞的效率會(huì)提高。
注意事項(xiàng):
1、使用前把試劑盒提供的RNase A全部加到溶液I(懸浮液)中,混勻,并在瓶上做好標(biāo)記。加入RNase A后4℃存放。
2、使用前在溶液IV(洗滌液)中加入C2H6O,混勻,并在瓶上做好標(biāo)記。
3、溫度較低時(shí),溶液II和溶液III可能會(huì)有沉淀產(chǎn)生。使用前需要檢查一遍。如有沉淀,37℃水浴加熱溶解,混勻后使用。溶液II請(qǐng)勿過分劇烈混勻,否則會(huì)產(chǎn)生大量氣泡。
4、溶液II使用完后,一定要蓋緊瓶蓋,防止被空氣中二氧化碳酸化。
5、溶液II有強(qiáng)堿性,溶液II、溶液III和溶液IV對(duì)人體有刺激性,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意適當(dāng)防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
6、本試劑盒所有操作均在室溫進(jìn)行,操作時(shí)無需冰浴。所有離心也均在室溫進(jìn)行。
7、廢液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丟棄。